HeLa細胞培養基
產品名稱:HeLa細胞專用培養基
產品貨號:TCH-G193
培養體系:MEM+10%FBS+1%P/S
產品規格:500mL / 200mL / 125mL
產品形態:液體
生物安全檢測:細菌、真菌、支原體檢測陰性
內毒素含量:<10 EU/mL
儲存條件:2-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
有效期:3 months
這種培養基 TCH-G193 由Cas9X海星生物技術團隊精心優化,可保持HeLa細胞理想的生長狀態。本產品已包含HeLa細胞生長的各種成分,無需額外添加,可直接用于HeLa細胞的體外培養。
注意事項
(1) 本產品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
(2) 使用前請將產品提前置于室溫或37°C充分預熱。
(3) 使用產品時應注意無菌操作,避免污染。
(4) 使用產品時請做好個人防護。
(5) 為保持本產品的最佳使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環境中。
(6) 所有產品請于保質期內使用,超出保質期,請放棄使用。
HeLa細胞復蘇及傳代培養簡要實驗步驟如下:
細胞培養試劑:DMEM培養基,胎牛血清,青霉素,鏈霉素,0.25%胰蛋白酶(含0.02%的EDTA),PBS等
細胞培養耗材:T25細胞培養瓶、移液槍吸頭、50ml離心管、15ml離心管、細胞計數板。
實驗室儀器設備:二氧化碳振蕩培養箱、 光學顯微鏡、瑞寧移液器、 超凈臺、 恒溫水浴鍋、酒精燈,-80冰箱,液氮罐,低溫冷凍存儲箱。
HeLa細胞復蘇步驟:
凍存液: 含10%血清的培養基和5%-10% DMSO
取對數生長期細胞, 精胰酶消化后加入適量凍存液,用吸管吹打制成 細胞懸液(1×106 ~5×106細胞/ml),加入1ml細胞于凍存管中,密封后標記細胞名稱和冷凍日期。
復蘇細胞是從零下80℃冰箱或液氮罐中取出凍存管,迅速投入37℃水浴中,使其融化(1分鐘左右),用培養集緩慢稀釋至原體積的10倍以上,大部分細胞貼壁后(4~6小時),吸取含有凍存液的培養基,并換成完培。
HeLa細胞復蘇實驗步驟:
1. 從零下80℃冰箱或者液氮罐中取出冷凍管,迅速投入37℃水浴中,使其融化(1分鐘左右)。
2.培養基緩慢稀釋至原體積的10倍以上。
3.低速離心10分鐘,吸去上清,加入新鮮的培養基培養剛復蘇的細胞。
HeLa細胞傳代實驗步驟:
取密度80%左右的Hela細胞,吸去舊的培養基,用PBS或者Trypsin消化液潤洗細胞以減少殘留的血清對Trypsin的抑制作用。
吸去PBS或者Trypsin,加入Trypsin消化液,于37℃消化2~4分鐘,于倒置顯微鏡下觀察,當細胞之間出現間時或者變圓時,吸掉Trypsin消化液。 加入適量HeLa細胞培養基 ,用移液器上下吹打數次打散細胞團塊以盡可能形成單細胞懸液,吹打均勻后,按照稀釋比例轉移至新的培養瓶中,補充完培并以正常培養條件培養。