在使用生物發(fā)酵罐進(jìn)行工業(yè)生產(chǎn)中,污染雜菌導(dǎo)致發(fā)酵失敗的問題頻繁出現(xiàn),給發(fā)酵企業(yè)的生產(chǎn)和經(jīng)濟(jì)效益帶來了嚴(yán)重影響。發(fā)酵染菌是指在發(fā)酵過程中,除了預(yù)期的產(chǎn)酶菌株外,其他微生物侵入發(fā)酵系統(tǒng),削弱了純種發(fā)酵的效果和價(jià)值。
污染雜菌的來源多種多樣,可能是空氣中的微生物、器皿、設(shè)備、原料、生物反應(yīng)器等帶入的,也可能是人員操作不當(dāng)引起的交叉污染。一旦發(fā)酵系統(tǒng)受到污染,污染雜菌會與發(fā)酵菌競爭營養(yǎng)、生長環(huán)境,抑制發(fā)酵菌的正常發(fā)育和產(chǎn)酶能力,從而導(dǎo)致發(fā)酵失敗。
一、不同的染菌途徑會對發(fā)酵過程產(chǎn)生不同的影響。
以下是幾種常見的染菌途徑及其影響:
1.種子帶菌:將種子攜帶細(xì)菌進(jìn)行染菌。這種方式可能造成發(fā)酵的延續(xù)性,導(dǎo)致后續(xù)發(fā)酵失敗,因?yàn)榉N子中攜帶的細(xì)菌可能會繼續(xù)繁殖并影響發(fā)酵的正常進(jìn)行。
2.空氣帶菌:通過空氣中存在的細(xì)菌對發(fā)酵過程進(jìn)行染菌。這種方式同樣會使染菌具有延續(xù)性,可能導(dǎo)致所有發(fā)酵罐都發(fā)生染菌現(xiàn)象。
3.培養(yǎng)基或設(shè)備滅菌不干凈:如果培養(yǎng)基或設(shè)備滅菌不干凈,可能會留下部分細(xì)菌存活,這些存活的細(xì)菌可能會影響發(fā)酵過程。
4.設(shè)備滲漏:設(shè)備滲漏可以引入外界的細(xì)菌污染,造成染菌的危害性較大,可能會導(dǎo)致嚴(yán)重的染菌現(xiàn)象。
二、染菌對產(chǎn)物提取和產(chǎn)品質(zhì)量的影響
在生物發(fā)酵罐中染菌對產(chǎn)物提取和產(chǎn)品質(zhì)量也會產(chǎn)生一定的影響。具體的影響包括:
1.對過濾的影響:
- 發(fā)酵液粘度增加:染菌會導(dǎo)致發(fā)酵液中的物質(zhì)增多,使得粘度增加,影響過濾操作的順利進(jìn)行。
- 菌體自溶:染菌可能導(dǎo)致菌體自溶,增加發(fā)酵液中的懸浮物,使過濾操作變得困難。
- 基質(zhì)殘留濃度增加:由于染菌導(dǎo)致發(fā)酵不干凈,發(fā)酵液中的基質(zhì)殘留濃度會增加,影響過濾的效果。
- 過濾時(shí)間延長:由于上述因素的影響,染菌會導(dǎo)致過濾時(shí)間延長,影響設(shè)備的周轉(zhuǎn),破壞生產(chǎn)平衡,并且大幅度降低過濾的收率。
2.對提取的影響:
- 對有機(jī)溶劑萃取工藝的影響:染菌的發(fā)酵液中可能含有更多的水溶性蛋白質(zhì),易于乳化,造成有機(jī)溶劑相與水相難以分離,影響萃取的效果。
- 對離子交換工藝的影響:雜菌可能會在離子交換樹脂上粘附或被吸附,降低交換量,影響工藝的正常進(jìn)行。
3. 對產(chǎn)品質(zhì)量的影響:
- 對內(nèi)在質(zhì)量的影響:染菌的發(fā)酵液中含有較多的蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì),可能會影響產(chǎn)品的純度。
- 對產(chǎn)品外觀的影響:某些染菌的發(fā)酵液在經(jīng)過過濾后可能會復(fù)濁,影響產(chǎn)品的外觀質(zhì)量。
4.染菌對三廢處理的影響
染菌會使過濾后的廢菌體無法再利用,增加廢液中的生物需氧量(BOD),從而增加三廢處理的成本。
對于檢查染菌的方法,目前常用的包括顯微鏡檢查、平板劃線檢查和肉湯培養(yǎng)檢查。此外,還可以通過監(jiān)測參數(shù)如pH值、尾氣中CO2含量和溶解氧等的異常變化來判斷是否發(fā)生了染菌。需要強(qiáng)調(diào)的是,確切的結(jié)果還需要以無菌試驗(yàn)結(jié)果為準(zhǔn)。
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