應(yīng)用于核酸檢測(cè)的“PCR儀”是什么?如何使用?
PCR儀是一種通過(guò)PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù),對(duì)特定DNA進(jìn)行擴(kuò)增的儀器。簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),就是當(dāng)采集到的樣品含量太低時(shí),通過(guò)PCR儀可將樣品擴(kuò)增數(shù)倍,起到信號(hào)放大的作用,方便后續(xù)檢測(cè)。
在核酸檢測(cè)處理中,實(shí)驗(yàn)人員將采集到的樣本經(jīng)過(guò)一系列前處理設(shè)備處理后,再放入PCR儀中擴(kuò)增,最終得到核酸檢測(cè)的結(jié)果。
PCR儀的分類:
按擴(kuò)增目的和檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)來(lái)分,PCR儀有普通PCR儀,梯度PCR儀,原位PCR,實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀等幾類。
其中,普通PCR儀一次PCR擴(kuò)增只能運(yùn)行一個(gè)特定退火溫度;梯度PCR儀可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度),單次擴(kuò)增效率更高;原位PCR能夠保持細(xì)胞或組織的完整性,使PCR反應(yīng)體系滲透到組織和細(xì)胞中,更有利于探討靶DNA與細(xì)胞之間的關(guān)系;實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀是在普通PCR儀設(shè)計(jì)基礎(chǔ)上增加熒光信號(hào)采集系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng),形成了具有熒光定量功能的PCR儀器。您在選擇PCR儀時(shí),根據(jù)自己的檢測(cè)需求、采購(gòu)預(yù)算等因素選擇合適的種類即可。
那么PCR儀該如何使用呢?
(1)首先把要檢測(cè)的樣品放入與PCR儀相匹配的反應(yīng)管中;
(2)打開(kāi)PCR儀機(jī)蓋,將反應(yīng)管平穩(wěn)、端正地置入,蓋好機(jī)蓋;
(3)打開(kāi)電源開(kāi)關(guān),按照機(jī)器屏幕顯示的提示設(shè)定程序。包括溫度、信號(hào)采集程序等等。
(4)用Proceed鍵起動(dòng)擴(kuò)增,結(jié)束時(shí)出現(xiàn)“Complete”。待儀器風(fēng)機(jī)停止工作后,關(guān)閉電源,取出樣品蓋好PCR基因擴(kuò)增儀護(hù)套。
注意:PCR儀工作時(shí)嚴(yán)禁打開(kāi)機(jī)蓋。
除了核酸檢測(cè),PCR儀在基因檢測(cè)、醫(yī)學(xué)試驗(yàn)、化學(xué)分析等領(lǐng)域也有廣泛的應(yīng)用。選型PCR儀時(shí),應(yīng)特別關(guān)注儀器的檢測(cè)靈敏度、準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性等參數(shù),并選擇具有專業(yè)資質(zhì)的廠商生產(chǎn)的產(chǎn)品,確保產(chǎn)品質(zhì)量和售后服務(wù)滿足您的需求。