凝膠成像儀相信大家都不陌生,它在生物實驗中都扮演著什么角色呢?今天我們就來了解一下:
1、 采集實驗過程中的圖像
凝膠成像儀的主要作用使通過自帶的CCD設(shè)備拍攝圖像并傳輸在電腦中。工作原理如下:在暗箱中的紫外燈照射下,通過紫外燈的光源,在暗箱中自動完成對焦成像并優(yōu)化所獲取的圖像信息存儲在設(shè)備中,實驗者可以在圖像中添加注釋貨相關(guān)信息,編輯完成后,即可打印或傳輸。
2、DNA或蛋白分子定量
通過凝膠電泳實驗獲得不同的DNA或蛋白條帶影像,再利用凝膠成像儀上的圖象處理軟件中相關(guān)功能自動比對Marker標準條值,來判別未知條帶的分子量。
3、密度定量
在DNA分子實驗中常常會用紫外吸收法來測定DNA/RNA的濃度, 但此方法只能測定總樣品中核苷酸的濃度,而單個基因片段上的核苷酸濃度卻無法測試。 而利用凝膠成像儀的圖象處理軟件,可對單片段進行密度標定后 ,根據(jù)單位條帶上的光密度值得到其DNA含量。此方法同樣適用于蛋白實驗。
4、密度掃描
分子生物學實驗中,需要經(jīng)常計算蛋白表達產(chǎn)物占全菌體蛋白的百分比。傳統(tǒng)的操作方法較為繁瑣,若利用固定波段的白光凝膠成像儀則可輕松完成密度掃描與計算。
5、PCR定量
凝膠成像儀不僅可以進行密度測量、分子量測定、圖像采集,還可用于PCR定量。我們在做PCR實驗時有時會擴增出多種不同的條帶,利用PCR定量指令可以自動計算單條帶占總條帶書的百分比,類似于密度測定功能。
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