實驗過程中,如果沒有準(zhǔn)確的移液,您的實驗數(shù)據(jù)將無法保證準(zhǔn)確 ,并且您的分析也會有較大差異,如何保證移液器的準(zhǔn)確度呢?
移液器屬于精密儀器,所以做好移液器的維護(hù),解它們的工作原理,熟練掌握移液器的使用技術(shù),才能保證移液器準(zhǔn)確度。
移液器的工作原理
1. 空氣置換型移液器
空氣置換移液器的工作原理有點像注射器,不同之處在于活塞和樣品之間有一個充氣墊。氣墊可防止活塞與溶液接觸。將溶液和移液管分開是好的,但它也對移液器施加了一些限制。
溫度和壓力會影響氣墊的體積,從而影響移液精度。此外,揮發(fā)性溶劑會蒸發(fā)到氣墊中,從而導(dǎo)致分配體積不準(zhǔn)確且低于移液器上顯示的體積。
空氣置換移液器的內(nèi)管也容易受到移液溶液的污染。所以,盡量不要吸取腐蝕性液體。
2. 非空氣置型換移液器
非空氣置型換移液器也被成為容積式移液器。容積式移液器的工作原理也類似于注射器的工作,但它們沒有氣墊。這使得它們在移取揮發(fā)性溶劑時更準(zhǔn)確,因為沒有地方(氣墊)讓溶劑蒸發(fā)。這也降低了移取腐蝕性物質(zhì)和生物危險材料時受到污染的機(jī)會,這使得容積式移液器更適合處理這些試劑。這種移液器一般造價昂貴,因為移液器和吸頭是一個單元,移液時都需要更換。當(dāng)然,還有一種辦法是使用外置活塞式移液器,這種移液器可用來吸取石油等黏稠液體及揮發(fā)、腐蝕性較強(qiáng)的液體。比如瑞寧的 Pos-D外置活塞式移液器。
保持移液器準(zhǔn)確度的方法:
1. 定期進(jìn)行移液器的維護(hù)和保養(yǎng)
從理論上講,移液器的維護(hù)保養(yǎng)頻率應(yīng)維持在,每 6-12 個月/次。這只是一個粗略的指南;根據(jù)您對準(zhǔn)確性的要求,您需要更頻繁地對其進(jìn)行維修。這項工作,可以自行完成,也可以交給售后服務(wù)進(jìn)行,據(jù)了解,Rainin系列移液器一般會為客戶提供定期免費(fèi)維護(hù)、校準(zhǔn)移液器等售后服務(wù)。正常的移液器維護(hù)校準(zhǔn)包括移液器的初校準(zhǔn)、清理、給易損部件加潤滑脂以及更換任何磨損的密封件或其他部件。
2. 每次實驗前做好移液器的點檢工作
檢查移液器的前端是否有任何明顯的損壞。如果出現(xiàn)問題,請及時報修,切勿帶故障工作。
3. 每天使用前需要清潔移液器
應(yīng)該用一些 70% 的乙醇擦拭移液器。
4. 使用移液器支架垂直存放移液器
以這種方式存放移液器可防止移液器桶中的任何液體進(jìn)入移液器內(nèi)部并導(dǎo)致腐蝕。
8. 切勿將移液器放在吸頭有液體的一側(cè)
使用過程中只有空氣才能將液體與移液管分開。所以移液管內(nèi)的任何液體都有可能導(dǎo)致污染,甚至?xí)?dǎo)致液體倒吸而造成嚴(yán)重的腐蝕損壞。
9. 保證吸頭的匹配度及正確安裝
在吸取和分配液體時,不匹配或安裝不當(dāng)?shù)奈^會導(dǎo)致空氣逸出,從而導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。
10. 需要保證正確使用移液器
關(guān)于移液器使用的有關(guān)基礎(chǔ)知識,請查看Rainin移液技術(shù)手冊。移液器的正確使用需要遵循以下原則:
①移液器動作緩慢、平穩(wěn);
②吸取液體時垂直握住移液器;
③吸取液體時,只需將吸頭稍微浸入液體即可。否則,您會在吸頭上涂上液體,液體將隨移液器內(nèi)的體積一起轉(zhuǎn)移;
④分配液體時,垂直握住移液器,但使接收容器的側(cè)壁保持 45 度角。移液器靠在側(cè)壁上或移入已經(jīng)存在的液體中。
11. 移液的準(zhǔn)確度的預(yù)測
其實你移液器操作技術(shù)是可以檢測的.具體方法如下:通過將 100 µL 分配到精細(xì)天平上來檢查您的移液技術(shù)的準(zhǔn)確性。您制作的液滴的質(zhì)量應(yīng)約為 0.1 克。現(xiàn)在重復(fù)做同樣的步驟 10 次并記錄你獲得的質(zhì)量。如果變化超過 +/-0.5%,那么您要么需要重新評估您的移液技術(shù),要么多加練習(xí)!
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